【目的】

我々は、天然物質や伝統医薬物の抗ウイルス作用について検討し、ウイルス感染症の治療に有効な物質の探索を行っている。これまでに、マウスのインフルエンザウイルス感染モデルを用いて、インフルエンザウイルス感染に対して強い抗ウイルス活性を有するブラジル産プロポリスであるAF−08を見出した。今回その活性物質を見出す目的で、AF-08を分別抽出し、各画分の抗ウイルス活性を検討するとともに、その抗ウイルス作用機序を解析した。

【方法】

MDCX．細胞にインフルエンザウイルス（A型/PR/8/34(H1N1)株）を感染し、AF−08およびその活性画分の存在あるいは非存在下で培養し以下を検討した。

1. MTT assay；分別抽出したAF-08の活性画分の抗ウイルス活性を検討した。
2. RT-PCR；細胞にウイルス（MOI＝1）を1時間吸着後、AF-08およびその活性画分を含む維持培地を添加した。培養6時間後に各サンプルから total RNA を抽出し、ウイルス（NP、Mの各蛋白質由来）mRNA を検出した。

【結果と考察】

1. MTT assay により、AF-08画分の抗ウイルス活性をEC50備にて評価した結果、AF-08と比較して、およそ10倍強い活性を有するメタノール – 水（MW3，4-1）画分を得た。
   そこで、
2. それら作用の機序解析をするためRT-PCRを実施したところ、非添加群と比較して、AF−08添加群のウイルスmRNA量には有意な合成量の減少が見られた。一方、MW3，4−1添加群ではmRNA合成量に変化は見られなかった。

以上から、AF−08の抗ウイルス作用機序には、ウイルスの増殖サイクルにおけるウイルスmRNA合成段階の抑制が一部関与していることが明らかになった。しかし、MW3，4-1が活性本体ではなかったことから、現在、さらにいくつかの活性画分を得ており、解析を行っている。