抗インフルエンザウイルス活性を有するプロポリスAF-08の活性物質の探索

【目的】

我々は、これまでにブラジル産プロポリスAf-08の抗インフルエンザウイルス作用機序が、ウイルスmRNAの合成阻害にもとづくことを明らかにしている。そこで、AF-08中の活性物質を明らかにするため、MDCK細胞培養系を用いたたプラーク形成抑制とウイルスmRNA合成抑制を指標に、分画したAF-08画分のうち、メタノール-水（MW）抽出物に抗ウイルス活性を有することを見出した。今回、さらにMW画分を分別抽出し、得られた20種類の画分について抗ウイルス活性を評価した。

【方法】

AF-08のMW画分はSephadexLH-20カラムを用いて、まず6種類に分画した（MW-1，2，3，4，5，6）。さらにMW-3を分画した4種類（MW3-1〜3-4）、およごMW-3-1を分画した10種類の画分（MW3-1〜3-1-10）を得た。これら画分の抗インフルエンザウイルス〔A/PR/8/34（H1N1）〕活性は、MDCK細胞を用いたプラーク減少法とリアルタイムRT-PCR法を用いた各画分によるウイルス（M遺伝子）mRNA合成抑制を評価した。

【結果および考察】

プラーク減少法の結果、6種類の画分のうちMW-3に最も強い抗ウイルス活性が認められた（AF-08の比活性の36.2倍）。また、これら画分の6μg/mIを用いてリアルタイムRTPCR法を行った結果、AF-08と比較してMW-3に強いウイルスのmRNA合成抑制が見られた。MW-3の画分4種類およびMW3-1画分10種類を用いて同様の検討をした結果、MW-3-1-1に強い抗ウイルス活性が見られ、さらにMW3-1-1に強い活性が認められた。以上から、AF-08の抗ウイルス活性はMW-3-1-11画分で最も反映されていることがわかった。現在、さらなる分画を行うと共に、それらの成分解析を行っている。